更新時間: | 2017-08-25 |
型 號: | 48T/96T |
所屬分類: | 人的ELISA試劑盒 |
報 價: |
公司專業銷售各種品牌的ELISA試劑盒。規格為96T和48T,中英文雙版說明書,服務于高校及免疫學科研單位。待檢樣本:體液,血清,血漿,細胞培養上清液,尿液,組織勻漿,心房水標本等等。
產品名稱:Human crystal proteins β,Cryβ ELISA
規格:原裝/96T 分裝 48T/96T
本試劑盒用于測定血清,血漿及相關液體樣本中(crystal proteins β)含量。
標本處理及要求:(Cryβ)
1.血清、血漿標本可直接測定;
2.尿液、腦脊液、腹腔液:2000-3000轉/分離心10分鐘后,取上清液待測。
3.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
4.采集后盡早進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
試劑盒組成:(Cryβ)
1 | 20倍濃縮洗滌液 | 30ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(180 ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標準規格酶標儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
操作步驟(Cryβ):
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標
準品 100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二
孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,
混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各
取 50μl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液 50μl,混
勻后從第七、第八孔中分別取 50μl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準
品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,
濃度分別為120ng/L,80ng/L ,40ng/L,20ng/L,10ng/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣
品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣
品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混
勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此
重復 5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止
液后 15分鐘以內進行。
計算(Cryβ):
以標準物的濃度為橫坐標,OD 值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的
OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,
即為樣品的實際濃度。
注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔OD值的),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 嚴格按說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
6.本試劑不同批號組分不得混用。
7.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.底物請避光保存。
檢測范圍(Cryβ):
8ng/L -150ng/L
保存條件及有效期(Cryβ):
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月