研謹生物Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅)由 0.05%胰酶、0.02%EDTA、
少量酚紅等組成,經過濾除菌。本試劑可以直接用于培養細胞的消化,或者一些組織的消化,通常室溫下 1~2min 左右就可以消化下大多數貼壁細胞。
產品組成:
Trypsin-EDTA solution(0.05%:0.02%,含酚紅) 100ml -20℃
自備材料:
1、 PBS、Hanks 液或無血清培養液
2、 顯微鏡
3、 離心機
操作步驟(僅供參考):
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min,
不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化;或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來,吸除胰酶細胞消化液。加入含血清的*細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
④如果發現消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發現細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量
去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
2、組織的消化
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
注意事項:
1、 盡量減少反復凍融的次數,以免失效。
2、在使用 Trypsin-EDTA solution 過程中,要特別注意避免消化液被細菌污染。3、Trypsin-EDTA solution 消化細胞時間不宜過長,否則細胞鋪板后生長狀況會較差。
4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12 個月有效。
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