實驗技術簡介:
雙向電泳(two-dimensional electrophoresis)是等電聚焦電泳和SDS -PAGE的組合，即先進行等電聚焦電泳(按照pI分離)，然后再進行SDS-PAGE (按照分子大小)， 經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。
實驗原理:
雙向電泳是目前為止zui有效、使用多的蛋白分離方法。差異蛋白質組學是在雙向電泳后用考麻斯亮藍、銀離子或熒光染料等將蛋白斑點染色,然后比較差異。本公司在各類微生物、培養細胞、動植物組織(如動物軟硬組織、體液、植物種子、葉子等)、亞細胞組分的雙向電泳分離及后續質譜鑒定中均有豐富的經驗。
蛋白質組學雙向電泳技術服務項目:
1.根據客戶需求定制蛋白質組學實驗方案
2.各種規格膠條長度的雙向電泳
3.考麻斯亮藍染色、銀離子染色; .
4.DIGE系統雙向電泳。
5.圖像分析
6.切膠質譜分析
服務說明:
1.我們的實驗只對我們制作的樣本負責,如您提供的是直接做等點聚焦的樣本，我們不敢保證蛋白的有效分離。
2.蛋白質組學實驗的總體實驗流程;
實驗流程:
1、樣本制備
2、固相預制膠條水化
3、第--向等電聚焦(IEF)
4、膠條平衡→第二向SDS-PAGE電泳
5、凝膠染色檢測
6、圖片掃描
雙向電泳服務結果提交:
1、實驗的試劑耗材、儀器設備、操作過程--份;
2、實驗結果凝膠掃描圖片;
3、電泳凝膠(可收費干膠) ;
4、剩余樣本。
說明:
1.樣品制備指可用通常程序處理的原樣，如樣品較特殊(需要去除核酸、鹽等雜質或需要濃縮)，價格將視進一步處理的難度和耗材用量另行商定;
2.建議客戶提供的原樣(組織、細胞、菌體等)濕重不少于100mg如直接提供蛋白提取物，則濃度不少于4ug/ul,總量不少于5mg;
3.樣品的還原和烷基化過程一般在制備時進行;
4.圖象處理與切膠主要是手I操作成本。
客戶方需提供:
細胞，組織或蛋白。
實驗周期:
5-10天
可提供技術支持: .
1、從現有的生物有機體基因組中,經過酶切消化或PCR擴增等方法，獲得帶有目的基因的DNA片段。
2、在體外，將帶有目的基因的外源DNA片段連接到具有選擇標記的載體分子上,形成能夠自主復制的重組DNA分子。
3、將重組DNA分子轉移到適宜的受體細胞，并使其一起增殖。
4、從大量的細胞繁殖群體中，篩選出獲得了重組DNA分子的受體細胞克隆。
5、由篩選出來的受體細胞克隆，提取出已經得到擴增的目的基因，供進一步分析研究使用。
6、將分離到的目的基因克隆到表達載體上，導入受體細胞，使之在新的遺傳背景下實現功能表達，產生出人類所需要的物質。
從2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務，協助客戶各類實驗服務及論文潤色十余年，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯系。
實驗代做服務：
WB代做 | HE染色 | 免疫熒光染色 | 蛋白相互作用分析 |
ELISA免費代檢測 | 免疫組化 | 熒光定量PCR | 番紅O固綠染色 |
流式細胞分選技術 | 激光共聚焦 | 透射電鏡服務 | DNA甲基化實驗 |
免疫共沉淀（Co-IP） | DNA甲基化 | 掃描電鏡實驗 | 石蠟冰凍切片TUNEL凋亡熒光 |
免疫組化IHC染色 | 分子克隆和質粒載體構建服務 | 原位雜交（FIsh） | 石蠟/冰凍切片凋亡 |
RNA結合蛋白免疫沉淀（RIP） | CCK8檢測 | 蛋白雙向(2-D)電泳 | 蛋白雙向2D-WB |
ATP/ADP檢測 | Taqman探針 | 細胞劃痕 | 基因組DNA提取 |
