更新時間: | 2017-09-22 |
型 號: | 48T/96T |
所屬分類: | 大鼠ELISA試劑盒 |
報 價: |
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶12( MMP-12)ELISA試劑盒原裝/分裝等各種品牌價格檔次的ELISA試劑盒。品種多,質(zhì)量好,靈敏度高。并提供免費代檢測服務(wù)(為您節(jié)省時間)具體詳情請。
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實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶 12(MMP-12 )水平。用純化的大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶 12(MMP-12 )抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入基質(zhì)金屬蛋白酶 12(MMP-12),再與 HRP標(biāo)記的 MMP-12抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的基質(zhì)金屬蛋白酶 12(MMP-12)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中人大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶 12(MMP-12 )濃度。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收
集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心
20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次
離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存
過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000
轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,
細(xì)胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20
分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保
存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻
漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一
份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
檢測范圍:
5ng/L -150ng/L
保存條件及有效期:
1 2-8℃。
2 6個月