大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)(PC-12)(高分化) |
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大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)(PC-12)(高分化)
細胞介紹 該細胞系來自能移植的雄性大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤。這些細胞表達神經生長因子(NGF)受體。NGF可誘導產生神經表型。這些細胞不合成腎上腺素。
細胞特性 1) 來源:大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤 2) 形態:貼壁生長,多角形,梭形 3) 含量:>1x106 4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性 5) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
細胞接收后的處理: 1) 收到細胞后,請檢查發貨培養瓶的狀況,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。 2) 在顯微鏡下確認細胞生長狀態時,hao在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態請在10X和20×物鏡下,同時給剛收到的細胞拍照,(10×,20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為細胞需要售后時提供收到細胞時細胞狀態的依據。 3) 觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h。 4) 貼壁細胞:在運輸過程中貼壁細胞會有脫落的現象,如發現貼壁細胞有脫落或者脫落后抱團生長,可將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和未貼壁細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到加有按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基的原培養瓶中(或新的培養瓶中)。 5) 懸浮細胞:T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,然后抽出瓶中的培養基和細胞1000rpm離心5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養瓶中(加入按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基)。 6)備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。 收到細胞后第yi次傳代建議1:2傳代 。
細胞用途:僅供科研使用。
本公司的細胞培養操作規程,供參考 一.培養基及培養凍存條件準備: 1) 準備1640(推薦iCell-0002)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養條件: 氣相:空氣:95%;二氧化碳:5%,溫度:37攝氏度,培養箱濕度:70%-80%。 3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。 二. 細胞處理: 1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。 2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。 對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法: 1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。 3. 輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。 4. 移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。 注:第yi次傳代推薦傳代比例為1:2,以后傳代比例可根據客戶需要自己決定。 3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。 下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,細胞變圓脫落后,加入2ml*培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。 3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項: 1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。 2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
實驗代做服務:
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