人胎盤cDNA說明書
Human Placenta cDNA
人胎盤 cDNA
Cat. No. YJ0568
保存:- 2 0 ℃ , 避 免 反 復 凍 融
組分說明
Cat. No. YJ0568
Volume 100 μl (20 reaction)
產品簡介
本產品是以人胎盤組織 RNA 為模板,oligodt 以及 Random 為引物, 用上海研謹生物的高靈敏度的逆轉錄酶(YJ0740)
反轉錄得到的 PCR 即用型 cDNA,可用于 PCR 實驗的陽性對照。
純度
OD260/280≈1.8
操作步驟
以下舉例為常規 PCR 反應體系和反應條件,實際操作中應根據模板、引物結構和目的片段大小丌同進行相應的改進
和優化。
1. PCR反應體系:
試劑 50 μl體系 終濃度
10×Taq PCR Buffer with Mg 2+ 5 μl 1×
dNTP Mix,2.5 mM each 4 μl 200 μM each
Forward Primer,10 μM 2μl 0.4 μM
Reverse Primer,10 μM 2 μl 0.4 μM
Human Placenta cDNA 5 μl
Taq DNA Polymerase,2.5 U/μl 0.5 μl
RNase-Free Water up to 50 μl
注意:1)引物濃度請以終濃度0.1-1.0 μM作為設定范圍的參考。擴增效率丌高的情況下,可提高引物的濃度;發生非特異性反應時,可降 低引物濃度,由此優化反應體系。
2)鎂離子濃度請以終濃度1.5-3 mM作為設定范圍的參考。本產品的10×PCR Buffer中已經含有15 mM鎂離子,可根據丌同的引物對和模板來調節鎂離子濃度,由此優化反應體系。
2. 將混合好的液體進行PCR反應。
3. 結果檢測:反應結束后取5 μl反應產物,加入適量上樣緩沖液后進行瓊脂糖凝膠電泳檢測。