LLC+luc小鼠肺癌細胞熒光素酶標記
,LLC/luc
貨號:YJ-0078a(LLC種屬鑒定)
價格: 3200.0
規(guī)格: 1x106
細胞描述
Lewis肺癌是一種從C57BL小鼠的肺中建立的細胞系,該細胞帶有原發(fā)性Lewis肺癌的植入所致的腫瘤,被廣泛用作轉移的模型,可用于研究癌癥化學治療劑的機制。
該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。
細胞特性
來源:小鼠肺癌組織
形態(tài):半貼壁生長,混合形態(tài),有上皮細胞樣,松散貼壁或懸浮有梭形、圓形等細胞形態(tài) 。
含量:含量:>1x106 細胞數(shù)
規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
用途:僅供科研使用。
細胞篩選
該細胞為穩(wěn)定轉染Luc的細胞,隨細胞傳代次數(shù)的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。
建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。
初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基維持培養(yǎng),若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養(yǎng)基繼續(xù)篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養(yǎng)基培養(yǎng),至細胞密度約80%,可繼續(xù)加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養(yǎng)基正常培養(yǎng)。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備:1640 基礎培養(yǎng)基(推薦:YJ-0002),優(yōu)質(zhì)胎牛血清10 %,P/S 1 %
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二.細胞處理:
1) 凍存細胞的復蘇:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
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