抗原-抗體結合反應的特點
抗原-抗體結合反應的專一性稱為特異性,這是由于抗原表位與抗體超變區(qū)中抗原結合點之間在化學結構和空間結構型上是互補關系。如果表位結構有很小的差異就會阻止兩者的特異性結合。如果兩種不同的抗原分子上有相同的抗原表位,則對于一種抗原的抗血清可與另一種抗原發(fā)生反應,即交叉反應(Cross reaction)。這是由于天然抗原表面常常帶有多種抗原表位,每種表位均能刺激機體產生一種特異性抗體,即一個抗原分子會刺激機體產生多種特異性抗體。一般來說多克隆抗體比單克隆抗體更容易發(fā)生交叉反應。
抗原抗體反應時,只有在兩者分子比例合適的時候才會出現(xiàn)zui強的反應,些時稱為抗原-抗體反應的等價帶(Zone of equivalence),如果一方過剩,早于過剩一方的結合價不能被*占據(jù),多呈游離的小分子復合物形成,或形成的復合物易解離,不能被肉眼察見。在等價帶前后分別為抗體過剩還和抗原過剩帶,此時兩者比例不適合,沉淀量少,上清液中可測郵游離的抗原或抗體;其中抗體過剩時為前帶現(xiàn)象(Prezone),抗原過剩時為后帶現(xiàn)象(Postzone)。如果兩比例合適,抗體分子的兩個Fab片段分別與兩個抗原表位結合后相互交聯(lián)形成具有立體結構的巨大網(wǎng)格狀復合體,在反應體系中基本不存在游離的抗原或抗體,此時形成肉眼可以分辨的沉淀物或凝集物。當兩者比例不合適時,只能形成較小的沉淀物或可溶性的復合物。
抗原抗體的結合取于兩個因素:一是抗體對相應抗原的親和國;二是環(huán)境因素對復合物的影響。高親各性的抗體上抗原結合點與抗原表位在空間構型上非常適合,兩者結合牢固,不易解離;低親和性抗體與抗原形成的復合物較易解離、在一定的外界環(huán)境下如低pH、高濃度鹽、反復凍融下,抗原抗體復合物也可被解離,解離后的抗原抗體仍保持原有的結構、活性及特異性。其中改變pH和離子強度是zui常用的促進解離的方法,借此可利用親和色譜的方法來純化抗原或抗體。