抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)的特點(diǎn)
抗原-抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性稱為特異性,這是由于抗原表位與抗體超變區(qū)中抗原結(jié)合點(diǎn)之間在化學(xué)結(jié)構(gòu)和空間結(jié)構(gòu)型上是互補(bǔ)關(guān)系。如果表位結(jié)構(gòu)有很小的差異就會(huì)阻止兩者的特異性結(jié)合。如果兩種不同的抗原分子上有相同的抗原表位,則對(duì)于一種抗原的抗血清可與另一種抗原發(fā)生反應(yīng),即交叉反應(yīng)(Cross reaction)。這是由于天然抗原表面常常帶有多種抗原表位,每種表位均能刺激機(jī)體產(chǎn)生一種特異性抗體,即一個(gè)抗原分子會(huì)刺激機(jī)體產(chǎn)生多種特異性抗體。一般來說多克隆抗體比單克隆抗體更容易發(fā)生交叉反應(yīng)。
抗原抗體反應(yīng)時(shí),只有在兩者分子比例合適的時(shí)候才會(huì)出現(xiàn)zui強(qiáng)的反應(yīng),些時(shí)稱為抗原-抗體反應(yīng)的等價(jià)帶(Zone of equivalence),如果一方過剩,早于過剩一方的結(jié)合價(jià)不能被*占據(jù),多呈游離的小分子復(fù)合物形成,或形成的復(fù)合物易解離,不能被肉眼察見。在等價(jià)帶前后分別為抗體過剩還和抗原過剩帶,此時(shí)兩者比例不適合,沉淀量少,上清液中可測(cè)郵游離的抗原或抗體;其中抗體過剩時(shí)為前帶現(xiàn)象(Prezone),抗原過剩時(shí)為后帶現(xiàn)象(Postzone)。如果兩比例合適,抗體分子的兩個(gè)Fab片段分別與兩個(gè)抗原表位結(jié)合后相互交聯(lián)形成具有立體結(jié)構(gòu)的巨大網(wǎng)格狀復(fù)合體,在反應(yīng)體系中基本不存在游離的抗原或抗體,此時(shí)形成肉眼可以分辨的沉淀物或凝集物。當(dāng)兩者比例不合適時(shí),只能形成較小的沉淀物或可溶性的復(fù)合物。
抗原抗體的結(jié)合取于兩個(gè)因素:一是抗體對(duì)相應(yīng)抗原的親和國(guó);二是環(huán)境因素對(duì)復(fù)合物的影響。高親各性的抗體上抗原結(jié)合點(diǎn)與抗原表位在空間構(gòu)型上非常適合,兩者結(jié)合牢固,不易解離;低親和性抗體與抗原形成的復(fù)合物較易解離、在一定的外界環(huán)境下如低pH、高濃度鹽、反復(fù)凍融下,抗原抗體復(fù)合物也可被解離,解離后的抗原抗體仍保持原有的結(jié)構(gòu)、活性及特異性。其中改變pH和離子強(qiáng)度是zui常用的促進(jìn)解離的方法,借此可利用親和色譜的方法來純化抗原或抗體。