Version06062012
EDTABuffer(50×)
EDTA緩沖液(IHC抗原修復液,50×)
Cat.No.K0129
保存:2-8℃
組分說明
Cat.No.
Volume
K0129
100ml
產(chǎn)品簡介
福爾馬林固定時,組織中的許多氨基酸殘基形成醛鍵、羧甲鍵而封閉了部分抗原決定簇,同時蛋白之間發(fā)生交聯(lián)也使
抗原決定簇隱蔽。因此,對于石蠟切片,要求在進行 IHC染色前,先進行抗原修復,即將固定時分子之間所形成的交聯(lián)破
壞,恢復抗原的原有空間形態(tài)。EDTA緩沖液是除檸檬酸緩沖液外另一種常用的 IHC抗原修復液。有部分抗原用 EDTA緩
沖液修復效果好于檸檬酸緩沖液。
注意事項
1.請使用足量的修復液,修復過程中保證組織切片*浸沒在修復液中。
2.使用沸水浴或高壓修復時,操作請務必謹慎,尤其高壓修復時,保證鍋內(nèi)有足量的修復液,以防止干燒。
3.推薦的修復時間為達到理想修復效果所需時間,如組織粘片不牢,容易掉片,請酌情減少修復時間。
使用方法
1.高壓熱修復:根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋 50倍后即可使用。將稀釋好的修復液加入高壓鍋內(nèi),將待修復切片浸于
其中,保證修復液沒過組織(最好將切片浸入盛修復液的塑料容器內(nèi),再置于鍋內(nèi)修復液浴中),蓋上壓力鍋蓋,加熱
至均勻噴汽,從噴汽開始計時,1~2分鐘后壓力鍋離開熱源,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾水沖洗后,再用PBS
(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復強度最大,是Z常用的熱修復法。
2.
微波熱修復:根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋 50倍后即可使用。將切片放入盛有修復液的容器中,置微波爐內(nèi)加熱至
沸騰,停止加熱,使容器內(nèi)液體溫度下降保持在 95℃~98℃之間并持續(xù) 10~15分鐘(注意:請根據(jù)具體機型酌情設置
條件,務必滿足以上步驟中對溫度和時間的要求)。取出容器,自然冷卻至室溫,取出切片,蒸餾水沖洗后,再用PBS
(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色步驟。此方法修復強度大于沸水浴,但小于高壓修復。
3.
沸水浴熱修復:根據(jù)需要量,取適量本品,稀釋 50倍后即可使用。將待修復切片*浸入盛有修復液的容器中,并將
此容器置于盛去離子水的大器皿水浴中,電爐上加熱煮沸,從修復液的溫度到達 95℃起開始計時 15~20分鐘。讓切片
在修復液中自然冷卻至室溫,蒸餾水沖洗,再用 PBS(0.01M pH7.4)漂洗 2次,每次 3分鐘。下接免疫組化染色
步驟。該方法效果較微波和高壓修復差。
實驗代做服務: