CCK-8試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法。向預(yù)先包被了抗體的酶標(biāo)孔中加入樣本，再加入生物素標(biāo)記的識(shí)別抗原，在三十七度下孵育三十分鐘，兩者與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合形成免疫復(fù)合物，經(jīng)PBST洗滌除去未結(jié)合的生物素抗原，然后加入親和素-HRP，親和素-HRP與生物素抗原結(jié)合，洗滌后結(jié)合的HRP催化TMB成藍(lán)色，隨后在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色，在一定波長(zhǎng)下有吸收峰，吸光值與樣本中抗原的濃度成負(fù)相關(guān)。
CCK-8試劑盒標(biāo)本收集需要注意的問題：
1、收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原，無內(nèi)毒素試管。
2、標(biāo)本應(yīng)清澈透明，懸浮物應(yīng)離心去除。
3、血清和血漿避免使用溶血，高血脂標(biāo)本。
4、可根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際情況，做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以確定稀釋倍數(shù))。
5、標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè)，需按一次使用量分裝， 凍存于二十度到零下八十度的電冰箱內(nèi)，避免反復(fù)凍融。
6、收集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)該做好防護(hù)措施(此如戴手套，護(hù)目鏡等)，認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險(xiǎn)性。
7、收集標(biāo)本，盡量做到雙份的用量，避免一次實(shí)驗(yàn)失敗，重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本缺失，從而耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
8、樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面，并且正確使用生物安全柜。
CCK-8試劑盒安全操作事項(xiàng)：
1、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
2、實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。
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