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總結(jié)一下美國程序降溫盒的那些使用經(jīng)驗
點擊次數(shù):4681 更新時間:2020-07-27
   美國程序降溫盒使用方法和經(jīng)驗分享:
  直接將需要冷凍的樣品放入程序降溫盒的孔位中,蓋好蓋子后將程序降溫盒放在一個- 80℃的干凈冷凍設(shè)備環(huán)境中至少3小時,期間不能打開。降溫完成后便可取出樣品轉(zhuǎn)移到液氮中。如果需要連續(xù)使用,則在常溫環(huán)境將產(chǎn)品上下蓋打開,恢復(fù)到常溫即可再次使用。
  美國程序降溫盒經(jīng)驗1:凍存盒外表面有刻度的吧,異丙醇液面要高于zui底線。
  美國程序降溫盒肯定是先放在室溫,然后放進去細(xì)胞,置于-80,利用異丙醇實現(xiàn)梯度降溫啊。
  美國程序降溫盒經(jīng)驗2:實驗室凍存盒平時放4度,需要凍細(xì)胞時直接拿出來用就可以了。第二天轉(zhuǎn)移至液氮,貴重的細(xì)胞盡快轉(zhuǎn)移,不然會影響復(fù)蘇成活率的。一般是用5次就更換一下異丙醇。現(xiàn)在也有一些商品化凍存液可以直接丟進-80的,很方便,效果也不錯的。
  美國程序降溫盒經(jīng)驗3:異丙醇的量是要保證的,不能低于表明的線,否則不能起到很好的程序性降溫作用,我們是在4度放置,放了細(xì)胞后立馬放到-80度冰箱,第二天再轉(zhuǎn)移到液氮,效果很不錯。
  異丙醇熔點:-87.9度的色透明具有乙醇?xì)馕兜目扇夹杂卸疽后w。注意了有可燃性!急性毒性:口服- 大鼠 LD50: 5840 毫克/ 公斤; 口服- 小鼠 LC50: 3600 毫克/ 公斤。刺激數(shù)據(jù):眼睛- 兔子100 毫克/ !請注意清理!
  美國程序降溫盒經(jīng)驗4:應(yīng)該不可以把凍存盒放4°的,因為梯度降溫的起始點是室溫20°左右,所以從-80℃拿出來的凍存盒應(yīng)該現(xiàn)在室溫靜置一段時間待其恢復(fù)到室溫再使用。而其中的異丙醇應(yīng)使用6~7此后更換一次,而且保證液體量達(dá)到刻度線,否則降溫效果會受到影響。
  美國程序降溫盒經(jīng)驗5:凍存盒里的異丙醇一般是250ml,低于刻度了要加上,理論上是5次以后更換異丙醇,但是異丙醇對環(huán)境有害,我們可以多用幾次,只是少了的時候要加滿。還有凍存液里面的DMSO對細(xì)胞有毒性,尤其是室溫的時候,所以凍存盒和凍存液先放4°,等把細(xì)胞用凍存液重懸好了放在凍存盒里,還放回4°,等到出細(xì)胞間的時候再拿到-80°里面保存。過夜再轉(zhuǎn)入液氮。
  美國程序降溫盒盒這個梯度降溫可大大提高細(xì)胞凍存的存活率,由于美國程序降溫盒存在100%濃度的異丙醇和泡沫內(nèi)襯,因此美國程序降溫盒也可以用于細(xì)胞復(fù)蘇。

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