影響制備價專一性抗血清的主要因素
1. 抗原本身的有關性質:抗原刺激免疫動物產生抗體的能力,是否使用佐劑,注射途徑及注射間隔時間等。
2. 抗原純化:對于免疫用的抗原,成分必須均一,除了作為免疫原的抗原物質外,不能含有可激發機體產生其它抗體的物質。在制備病毒抗血清時,必須去除寄主蛋白成分;假若這種材料是互不相同的病毒復合感染的,還必須將這些互不相同的病毒一一分離。只有制備了具有一定濃度的純化的抗原,才能制備出價的專業性抗血清。
3. 抗原與免疫動物必須具有易源性:雖然在動物體里存在著自體的隔離束縛,成為自體免疫原,從而引起自身免疫方面的疾病。但是機體內絕大多數蛋白質和核酸對自身是不能激發產生抗體的。在正常情況下,種屬差異相距愈近,其抗原物質使機體產生相應抗體的能力愈弱,反之則愈強。顯然,從免疫過的兔子體內得到的抗體后,在制備第二抗體時,就不能把兔子抗血清中提取的免疫球蛋白作為抗原再去注射另一只兔子,而是應該去注射羊、驢或馬等種屬關系相距較遠的動物。
4. 抗原分子必須具備一定的分子量和結構:作為蛋白質抗原,分子量一般不應該低于10000,但對于有些分子,情況就比較特殊,分子量僅為451的N-乙酰-L酪氨酸免疫豚鼠可以產生抗體,而角蛋白和非溶性的纖維蛋白分子量雖然遠遠大于10000,卻不能激發機體產生抗體。從總的情況看,分子量越小則進入機體后越容易被排除。另外,抗原的免疫原性還取決于抗原分子表面的某些化學基團(即抗原決定簇)的性質,如數目、電荷、光學構型和空間構象,而抗原決定簇的特異結構又與整個蛋白質的立體結構密切相關。完整結構的病毒粒子、病毒的外殼蛋白和病毒白亞基單體三者之間的免疫原性是互不相同的。
5. 在制備抗血清時,zui重要的是要注意抗原的純化。否則,制備的抗血清將很難在免疫酶技術中使用。
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