抗原純化的一般方法
抗原物質的純化方法很多,下面介紹抗原的一般純化方法。
1. 微生物、類立克次本、類菌質體和病毒等抗原的純化
首先應分離出純化的株系或毒株,并對該株系或毒株進行生物化學、血清學、紫外吸收光譜、電鏡觀察等鑒定,然后將經過簽定的純化株系或毒株進行生物學繁殖,在適當時間再將所需株系和毒株提純,得到大量材料,zui后再予以鑒定,并測定其濃度。
在此要特別注意以下幾點:1.材料本身是否穩定,如果不太穩定就要尋找使它穩定的條件;2,材料是否容易從寄主中提純,利率是否高,要盡量尋找利率高的提純方法;3,材料本身免疫原性(即抗原性)是否強,經提純所得材料免疫原性是否損失,要盡量尋找免疫原性強的材料作為抗原,而提純的方法也以不損害材料的生物活性和抗原性為前提。
所以在進行微生物等抗原純化的時候,必須熟悉材料的性質、了解材料的繁殖方法和掌握抗原的提純方法,對工作環境所具備的提純設備及其功能的要心中有數。總之,不能草率純化微生物等抗原。
2. 動植物(包括人體)器官組織內的各種蛋白質成分(如激素和酶等)作為抗原物質的純化
必須解決這些蛋白質或蛋白質復合體與器官和組織內的其他成分的分離,并且要保證所需蛋白質或蛋白質復合體不因為提純過程的處理而變性,影響免疫原性。因此,熟悉所提純蛋白質或蛋白質復合體的理化性質,掌握必要的生物化學實驗技術,是獲得器官組織內蛋白質抗原的前提。對于該抗原物質也要進行純度鑒定,并且要測定濃度。
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